ELISA 테스트는 수많은 질병을 감지하기 때문에 의학 등에서 광범위하게 응용되고 있습니다. 그러나 ELISA 검사는 라임 병 진단으로 가장 잘 알려져 있습니다. ELISA 시험은 무엇입니까? 결과를 해석하는 방법? 시험 가격은 얼마입니까?
목차 :
- ELISA 테스트-무엇을 감지합니까? ELISA 시험의 적용
- ELISA 시험-시험이란 무엇입니까?
- ELISA 테스트 및 라임 병-언제 수행해야합니까?
- ELISA 테스트-가격. ELISA 시험 비용은 얼마입니까?
- ELISA 테스트-결과. 거짓 양성일 수 있습니까?
- ELISA 테스트-결과. 거짓 음성 일 수 있습니까?
ELISA 테스트, 즉 효소 결합 면역 흡착 분석은 일반적으로 사용되는 실험실 방법으로 다음과 같은 역할을합니다. 혈액 내 항체의 정량적 검출을 위해.
이러한 이유로 ELISA 테스트는 라임 보렐리 증과 같은 세균성 질병의 진단에 적용됩니다.
ELISA 방법의 장점은 단순함과 빠른 구현 가능성과 높은 감도입니다. ELISA 방법은 예를 들어 Borrelia 단백질 (항원) 및 환자의 샘플에서 항체를 검출하도록 설계된 특정 단일 클론 항체로 채워진 웰이있는 특수 플라스틱 플레이트를 사용하여 수행됩니다.
ELISA 테스트-무엇을 감지합니까? ELISA 시험의 적용
ELISA 방법의 높은 감도와 단순성으로 인해 많은 질병의 진단에 적용 할 수 있었지만 라임 병의 진단 방법으로 가장 잘 알려져 있습니다.
라임 보렐리 시스 진단의 경우, 소위 간접 ELISA : 테스트 된 물질에서 특정 IgM 또는 IgG를 검출 할 수 있습니다. 같은 방식으로 항체를 검출하여 진단 할 수 있습니다.
- 바이러스 감염 : 헤르페스 바이러스 (헤르페스, 대상 포진 바이러스, Epstein-Barr, 거대 세포 바이러스), HIV, 간염 바이러스 (HBV 및 HCV)
- 원생 동물 감염 : 톡소 플라스마 증, 편모충 증
- 자가 면역 질환 : 체강 질환 (항 -tTG 또는 항 -DPG 항체), 하시모토 병 (항 -TG 및 항 -TPO 항체), 염증성 장 질환 (항 -ASCA 및 항 -ANCA 항체)
- 특정 IgE 항체가 검출되는 기생충 질환 및 알레르기. 이들의 증가 된 수치는 예를 들어 꽃가루 및 음식에 대한 알레르기 또는 기생충 침입 (무장 촌충, 인간 회충)의 존재를 나타낼 수 있습니다.
ELISA 방법 (소위 샌드위치 ELISA)에도 변형이있어 항체 이외의 단백질 샘플을 검출 할 수 있습니다. 그런 다음 테스트의 목적은 생물학적 물질을 감지하는 것입니다.
- 바이러스 또는 박테리아 조각, 대부분 주어진 병원체의 특징적인 항원
- 혈청 호르몬, 예 : 에스트로겐, 프로락틴, TSH, fT4, 코티솔
- 효소, 예 : 칼 프로텍 틴, 췌장 엘라 스타 제, 알칼리성 포스파타제
- 종양 마커, 예 : CA-125
- 혈청에 약물의 존재
이 방법은 미량의 알레르겐 (예 : 우유, 땅콩), GMO 또는 식품의 독소를 검출 할 수있는 식품 산업에도 적용됩니다.
ELISA 테스트-그게 무엇입니까?
예를 들어, ELISA 방법을 사용한 라임 보렐리 시스의 진단은 생물학적 물질 (보렐리 아 항원에 대한 반응 중에 발생하는 항체)에서 면역 단백질을 검출하는 것으로 구성됩니다.
항체는 IgM과 IgG의 두 가지 클래스로 테스트됩니다. IgM은 박테리아와 접촉 할 때 체내에 나타나는 최초의 항체이며 시간이 지남에 따라 감소합니다.
그들의 자리는 수십 년 동안 체내에 남아있을 수있는보다 지속적인 IgG 항체가 차지합니다.
이런 식으로, 보렐리 아 스피 로체 테스에 특이 적으로 지시 된 항체를 검출하여 체내 박테리아의 존재 여부를 간접적으로 테스트합니다.
다양한 감염 단계에서 항체는 다양한 보렐리 아 단백질에 대해 지시 될 수 있습니다. 예를 들어, 초기 단계에서는 p41 단백질입니다.
후기 단계에서는 p21, p30, p39, p43과 같이 점점 더 많은 단백질이 나타나기 시작합니다. 이것이 라임 병의 진단이 극도로 어려운 이유입니다.
박테리아 단백질의 선택은 검사가 높은 진단 가치를 갖기 위해 매우 중요합니다. 따라서 일상적으로 라임 병을 진단 할 때 가장 신뢰할 수있는 결과를 얻기 위해 단백질 세트를 선택하는 II 세대 또는 III 세대 ELISA 검사를 사용해야합니다.
ELISA 테스트 및 라임 병. 언제해야합니까?
라임 보렐리 증은 보렐리 아 부르크 도르 페리 (Borrelia burgdorferi) 박테리아와 그 많은 종류에 의해 발생하는 세균성 질병입니다.
보렐리 아에 대한 면역 반응의 복잡성과 실험실 방법의 불완전 성으로 인해 질병의 진단이 쉽지 않습니다.
가장 일반적으로 사용되는 실험실 방법은 박테리아 단백질에 대해 생성 된 특정 항체를 검출하는 고감도 ELISA 방법입니다.
라임 보렐리 증 진단에서 간접 ELISA 방법이 사용되며 다음 단계가 구별됩니다.
- 환자로부터 수집 한 물질 (예 : 혈청)을 사용하여 플레이트 위의 웰 배양. 시험 물질에 Borrelia에 대한 항체가 있으면 반응 하단의 단백질과 잘 결합합니다.
- 그런 다음 여분의 세럼은 특수 세척액 (완충액)으로 헹구고 소위 접합체, 즉 반응 웰에서 이전에 연결된 항체에 결합하는 효소에 연결된 항체
- 그런 다음 접합체의 기질을 추가하고 색 반응이 발생하거나 (양성 결과) 색 반응이 없음 (음성 결과)
- 마지막 단계는 판독기 (분광 광도계)가 환자의 혈청에서 Borrelia에 대한 항체 농도를 읽는 것입니다.
라임 병에 대한 ELISA 검사는 혈액과 신경 학적 증상 (신경 보충 증)의 경우 뇌척수액에서 수행됩니다.
위양성 결과가 나올 가능성이 높으므로 활액을 검사해서는 안됩니다.
질병 진단의 근거는 실험실 테스트 결과로 확인 된 임상 증상입니다.
보렐리 아에 대한 항체가 건강한 사람 에게서도 검출되는 것으로 나타났기 때문에 증상없이 실험실 검사 결과를 추가한다고해서 라임 병 진단이 승인되지는 않습니다.
라임 보렐리 증의 혈청 학적 진단은 반 정량적 스크리닝 ELISA 테스트로 시작됩니다. 결과가 음성이면 Borrelia spirochetes가 발견되지 않았거나 결과가 위음성임을 의미합니다.
결과가 양성이거나 약하게 양성 (모호함)이면 높은 특이성을 특징으로하는 확증 웨스턴 블롯 테스트를 수행해야합니다.
이것은 ELISA 결과가 "참"임을 확인하기위한 것입니다. 진단 중에는 위의 단계를 건너 뛸 수 없으며, 예를 들어 즉시 웨스턴 블롯 방법을 사용하여 진단을 수행하거나 양성 ELISA 결과만을 기반으로 진단을 내릴 수 없습니다.
폴란드에서는 라임 병의 진단이 첫 번째 선별 단계에서 끝나는 경우가 매우 많으며, 이로 인해 양성 또는 약한 양성 결과가 잘못 해석됩니다.
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테스트 비용은 약 PLN 60이며 즉시 완료됩니다. 그러나 의뢰 결과는 약 3 개월 정도 기다릴 수 있습니다.
ELISA 테스트-결과. 거짓 양성일 수 있습니까?
위양성 결과는 IgM 항체와 다른 단백질의 교차 반응으로 인해 발생합니다. 신체에서 생성 된 항체는 다른 미생물의 항원을 보렐리 아 항원으로 '잘못'인식 할 수 있습니다.
가장 흔한 "실수"는 treponema pallidum, herpesvirus에 감염된 사람과 전신성 홍 반성 루푸스 및 기타 류마티스 질환이있는 사람에게서 발생합니다.
ELISA 테스트-결과. 거짓 음성 일 수 있습니까?
위음성 결과는 감염 초기에 나타날 수 있으며 약 3-4 주 후에 검사를 반복해야합니다. 이것은 ... 불리운다 혈청 학적 창은 신체가 아직 특정 항체를 생산하기 위해 "관리"되지 않은 초기 감염 기간입니다.
마찬가지로 충분한 항체를 생산하지 않는 면역 결핍 환자도 마찬가지입니다.
특히 매우 심한 감염에서 큰 문제는 소위 Borrelia spirochetes 항원과 그에 특이적인 항체로 구성된 면역 복합체.
결과적으로 항체는 ELISA와 같이 일반적으로 사용되는 방법에 대해 "보이지 않는"상태가되며 테스트 된 물질에 존재하더라도 검출 할 수 없습니다.
그러한 경우 실험실은 면역 복합체 분해를 사용할 수 있습니다. 이 치료법은 항체를 방출하도록 설계되었습니다. 그러나이 방법은 실험실의 표준화 부족으로 인해 널리 사용되지 않습니다.
알만한 가치라임 병 진단이 쉽지 않은 이유는 무엇입니까?
이것은 Borrelia에 대한 면역 반응의 복잡성과 실험실 방법의 한계 때문입니다. 특히 유럽 대륙에서 감염을 일으키는 변종의 다양성과 새로운 변종의 출현은 효과적인 진단 방법의 개발을 촉진하지 않습니다.
Borrelia bissetii, Borrelia valaisiana 및 Borrelia spielmanii와 같은 더 많은 품종이 최근 유럽에서 나타났습니다. 또한 신체에서 Borrelia spirochetes는 낭종으로 변하거나 면역계 세포에 접근 할 수없는 신체 부위에 머물 수 있습니다.
따라서 면역 체계에 "보이지 않는"것입니다. 또한, 조직에는 강한 염증 유발 특성을 갖는 박테리아 조각이 포함되어있을 수 있음이 밝혀졌습니다. 그들은 부정적인 실험실 테스트 결과에도 불구하고 라임 병의 만성 증상에 대한 책임이 있다고 믿어집니다.
문학
1. Witecka-Knysz E. et al. 라임 병 : 진단이 왜 그렇게 어려운가? 실험실 진단사 2007 년 4 월.
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3. 진드기 매개 질병의 실험실 진단 실무 그룹의 권장 사항 : 국립 실험실 진단 회의소, 국립 공중 보건 연구소-국립 위생 연구소, 감염 질환 분야의 국립 컨설턴트, 감염성 질환 및 신경 감염과, Białystok 의과 대학, 폴란드 바이러스 학회, 바르샤바 2014
4. Hosseini S. et al .: Enzyme-linked Immunosorbent Assay (ELISA) From A to Z. Springer 2017.
